Изосерологические исследования крови
Изосерологические исследования крови доноров и реципиентов условно можно разделить на две категории:
- обязательные, без которых немыслимо переливание крови,
- необязательные, которые производятся в сомнительных случаях.
Вторые обычно делают в специализированных лабораториях.
К обязательным исследованиям относятся:
- определение группы крови системы АВ0;
- определение резус-принадлежности (Rh0 (D)-принадлежности) ;
- определение групповой совместимости;
- определение резус-совместимости крови донора и реципиента.
К этой же категории следует отнести биологическую пробу, которая, строго говоря, не относится к лабораторным методикам, но обязательна для каждой гемотрансфузии.
К необязательным изосерологическим исследованиям крови можно отнести определение антигенов прочих систем (MN, Келл, Даффи, Р, Льюис), факторов rh´ (C) и rh´´ (E), резус-антител и т. д.
Исследование антигенной структуры эритроцитов (группа крови, резус-принадлежность и т. д.) производится с помощью соответствующих стандартных антисывороток. Методика определения антигена зависит от вида антител, содержащихся в стандартных сыворотках.
Вид антител сывороток, режим их работы и методика исследования ими крови должны быть известны заранее. В тех случаях, когда приходится начинать работу с новой для лаборатории стандартной сывороткой, необходимо предварительно тщательно изучить методику.
Определяя группу крови, резус-принадлежность, титр резус-антител или выполняя любое другое изосерологическое исследование, необходимо строго придерживаться методики. Это вызвано тем, что стандартные сыворотки приготовлены и выверены по определенной методике и только при строгом ее выполнении можно получить точный результат.
Антитела исследуются с помощью стандартных эритроцитов, которые чаще всего необходимо приготовлять непосредственно перед исследованием.
«Семинары по переливанию крови»,
Л.В.Иванов, И.П.Данилов, Б.А.Шуваева
Стандартные сыворотки для определения групп крови приготовляют из крови человека. В основном это кровь доноров или ретроплацентарная. Стандартные гемагглютинирующие сыворотки выпускаются обычно в ампулах по 2 мл. На этикетке каждой ампулы должны быть обозначены: группа сыворотки, титр, количество, срок годности, номер серии и наименование учреждения, изготовившего ее. Титром сыворотки называется наибольшее ее разведение, в котором …
Возможны два способа определения групп крови: при помощи стандартных сывороток, когда устанавливают наличие или отсутствие в эритроцитах антигенов А и В, т. е. как определяют группы крови у реципиентов; по стандартным сывороткам определяют в эритроцитах антигены и одновременно с помощью стандартных эритроцитов исследуют сыворотку (плазму) крови на присутствие в ней изоагглютининов аир (перекрестный способ). Оснащение …
Учет результатов основан на наличии или отсутствии агглютинации исследуемых и контрольных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов. Для того чтобы учесть реакцию, пробирки просматриваются в проходящем свете чаще всего невооруженным глазом, реже — через лупу с двукратным увеличением. При положительном результате агглютинаты хорошо видны на фоне почти обесцвеченной жидкости в виде красных зерен или хлопьев. При отрицательном …
Кровь берется в пробирки в среднем по 5 мл, без стабилизатора. При хранении сывороток возможно снижение титра резус-антител, поэтому исследование старых сывороток может дать неправильный результат. Если исследование сыворотки в день взятия крови невозможно, ее необходимо законсервировать кристаллической борной кислоиз расчета 4% консерванта и хранить в холодильнике при температуре +4°. Для того чтобы исключить высыхание …
Группа крови у лиц, которым предполагается переливание, определяется врачом или специально подготовленным средним медицинским персоналом под наблюдением врача при помощи стандартных сывороток двух серий каждой группы. Результат записывается в верхнем правом углу лицевого листа истории болезни с указанием даты и подписью врача, производившего или контролировавшего определение. Помимо определения группы крови у больного при поступлении в …
Стандартные сыворотки антирезус приготовляются из крови резус-отрицательных людей, сенсибилизированных к резус-фактору. Чаще всего такими лицами являются женщины, сенсибилизированные резус-несовместимыми беременностями, реже — внутривенными, подкожными или внутримышечными введениями резус-положительной крови. В связи с тем, что кровь, содержащая резус-антитела, представляет большую редкость и ценность, резус-сенсибилизированные лица (женщины) должны находиться на особом учете. Приказом МЗ СССР № 280 …
Группа крови определяется врачом или специально подготовленным средним медицинским персоналом под наблюдением врача. Результат фиксируется в правом верхнем углу лицевого листа истории болезни за подписью врача, который производил или контролировал определение. Определение групп крови производится в хорошо освещенном помещении при температуре от +15° до +25°. Для этого подготовляют белые тарелки (или пластинки со смачиваемой поверхностью), …
Определение резус-принадлежности в солевой среде требует стандартных сывороток, содержащих полные солевые антитела антирезус. В настоящее время этим методом пользуются в основном специализированные резус-лаборатории. Определение резус-принадлежности солевым методом производится в пробирках высотой 20 — 25 мм, диаметром 5 — 6 мм. Обязательным условием должно быть гладкое сферическое дно пробирки. Рабочее место оснащается так же, Как и …
После инкубирования смеси исследуемых сывороток со стандартными эритроцитами последние трижды отмываются в физиологическом растворе. Для этого все пробирки доливаются доверху физиологическим раствором и их содержимое перемешивается путем переворачивания. После этого пробирки центрифугируются при 1000 — 1500 об/мин до полного осаждения эритроцитов (обычно 5 мин). Затем надосадочная жидкость полностью удаляется путем отсасывания и пробирка снова наполняется …
Проба на групповую совместимость крови донора и реципиента производится с каждым флаконом, одновременно с определением группы крови донора и реципиента, непосредственно перед гемотрансфузией, при комнатной температуре (от +15 до +25°). С помощью пробы на групповую совместимость устанавливают наличие или отсутствие в крови реципиента полных антител, направленных против донорской крови из данного флакона. Природа антител, если …