Материалом для исследования могут служить:
-
стерильно взятые носовые выделения,
-
гнойное отделяемое язв,
-
пунктаты подкожных абсцессов,
-
кусочки органов из трупа,
-
лимфатические узлы.
Консервирование материала возможно 30%-м стерильным глицерином.
Микроскопическое исследование — микроскопия мазков из патологического материала ввиду отсутствия специфических методов окраски бактерии сапа имеет ограниченное диагностическое значение, но важна для исключения других возбудителей. Мазок окрашивают по Граму и по Романовскому-Гимзе.
Бактериологическое исследование — посевы материала производят на глицеринизированный картофель, мясопептонный агар и бульон. На картофельно-глицериновой среде через 3-4 дня наблюдается характерный рост возбудителя сапа в виде янтарно-коричневого цвета слизистого налета. К 6-8-му дню культура становится мутной, красноватого оттенка. Чистую культуру получить не всегда удается, так как посторонняя флора препятствует росту палочки сапа. При хроническом сапе бактериологическое исследование часто дает отрицательный результат.
Для идентификации возбудителя учитывают его:
-
биохимические свойства,
-
агглютинабельность,
-
патогенность для лабораторных животных.
Биологической пробой заражаются морские свинки (самцы), хомяки, кошки. Исследуемый материал можно вводить подкожно (если он не загрязнен), но более надежно внутрибрюшное заражение. Через 3-5 дней у зараженного самца развивается орхит. Через 8-15 дней большая часть свинок погибает. На высоте заболеваний свинок забивают и производят бактериологическое исследование органов и тканей.
Серологическое исследование — основным методом исследования реакция связывания комплемента (РСК), реакцию пассивной гемагглютинации. РСК более чувствительна. Исследование проводят в динамике с учетом нарастания титра антител. При хроническом сапе РСК нередко бывает отрицательной.
Аллергическая проба имеет важное значение для подтверждения диагноза сапа. Внутрикожно или накожно на предплечье вводят 0,1 мл маленна (фильтрат 4-недельной бульонной культуры палочки сапа, разведенной в 100 раз). В положительном случае через 24-48 ч на месте введения маленна появляется гиперемия, припухлость, болезненность. При этом может наблюдаться общая реакция в виде недомогания, повышение температуры тела. Проба становится положительной с 10-15-го дня болезни.