Определение порфобилиногена (унифицированный метод с пара-диметиламинобензальдегидом)
Принцип метода
Порфобилиноген (ПБГ) реагирует с пара-диметиламинобензальдегидом с образованием окрашенного в красный цвет соединения. Для повышения специфичности реакции добавляют ацетат натрия. Соединения, дающие аналогичную реакцию с пара-диметиламинобензальдегидом (уробилиноген, производные индола, скатола и др.), удаляют путем экстракции хлороформом и бутанолом, в которых ПБГ нерастворим.
Необходимые реактивы
I. 4-(диметиламино)-бензальдегид (пара-диметиламинобензальдегид).
II. Соляная кислота концентрированная.
III. Реактив Эрлиха: 0,7 г пара-диметиламинобензальдегида растворяют в 150 мл концентрированной НСl, приливают к 100 мл дистиллированной воды и смешивают. Раствор должен быть бесцветным или слегка желтым. Хранят в посуде из темного стекла. Реактив стабилен.
IV. Натрия ацетат, насыщенный раствор: 375 г CH3COONa * 3Н2О (или 226 г CH3COONa) растворяют в 250 мл теплой дистиллированной воды, охлаждают до комнатной температуры. Хранят при температуре 20 °С. Раствор должен быть бесцветным и прозрачным.
V. Хлороформ.
VI. Бутиловый спирт.
VII. Бумага индикаторная для измерения рН (в интервале 4,0—5,0).
