Принцип метода
Магний дает с магоном (ксилидиловый синий II) яркое окрашивание, белки сыворотки не препятствуют его развитию. В связи с тем, что на интенсивности окраски сказывается присутствие других катионов, используют комплексный калибровочный раствор. Фирма «Лахема» выпускает набор реактивов для работы этим методом.
Необходимые реактивы
I. Раствор магона, содержащий 0,28 ммоль/л: 115,4 мг магона при нагревании растворяют в 50 мл диметилформамида, объем доводят до 1 л 96%-ным этиловым спиртом.
II. 0,02 М боратный буфер рН 9,5: примерно в 800 мл воды растворяют 7,63 г буры (Na2B4O7 * 10Н2О), прибавляют 79 мл 0,1 н NaOH и проверяют рН, добавляют столько щелочи, сколько необходимо, чтобы рН был 9,5, после чего водой доводят объем до 1 л.
III. Рабочий раствор магона — в день определения смешивают равные части раствора магона и боратного буфера, реактив нестоек, годен в течение одного рабочего дня.
IV. Комплексный калибровочный раствор: 200 мг металлического магния в виде стружки промывают разбавленной НСl, водой, спиртом и эфиром, высушивают сначала в токе азота, затем под вакуумом и растворяют в 15 мл концентрированной НСl, добавляют около 200 мл воды и 2,5 г кальция карбоната (СаСО3), 2,86 г калия хлорида (КСl) и 65,4 г натрия хлорида (NaCl). После растворения всех ингредиентов объем доводят водой до 1 л. Получается раствор, содержащий 200 мг магния в 1 л, перед употреблением его разводят водой в 10 раз, получается рабочий калибровочный раствор, содержащий 0,823 ммоль/л магния (2 мг%).
Ход исследования
К 4 мл рабочего раствора магона прибавляют 30 мкл исследуемой сыворотки или спинномозговой жидкости, перемешивают и фотометрируют в кювете с длиной оптического пути 1 см при длине волны 505 нм против холостого опыта, в котором вместо сыворотки берут воду. Одновременно ставят калибровочный опыт, в котором вместо сыворотки берут 30 мкл рабочего калибровочного раствора, содержащего 0,823 ммоль/л магния. Расчет ведут по правилу пропорций.