Исследование водно-солевого обмена

Кровь берут с гепарином из расчета 0,1 мл на 5 мл крови. Эритроциты отделяют центрифугированием, плазму отсасывают, а клетки дважды промывают изотоническим раствором натрия хлорида при температуре 4 °С, каждый раз центрифугируя, отсасывая надосадочную жидкость и вновь ресуспендируя в новой порции раствора. К 0,5 мл эритроцитной взвеси добавляют 0,5 мл 15%-ной трихлоруксусной кислоты, перемешивают палочкой, …

Принцип метода Белки эритроцитов осаждаются хлорной кислотой, избыток которой удаляется в виде калиевой соли. Безбелковый фильтрат хроматографируется в тонком слое на пластинах «Силуфол», нуклеотиды идентифицируются в ультрафиолетовом свете и определяются по светопоглощению элюатов. Необходимые реактивы I.  Диоксан. II.  Изопропиловый спирт. III.  Аммиак, концентрированный раствор. IV.  Кислота хлорная, 0,8 н (8%-ная НСlО4). V.  Калия карбонат, раствор …

Кровь берут с гепарином, добавляя его из расчета 12 ME на 1 мл крови. Эритроциты отделяют центрифугированием, плазму отсасывают, а клетки 3 раза промывают холодным изотоническим раствором натрия хлорида, каждый раз центрифугируя по 20 мин при скорости 3000 об./мин. К 1 мл эритроцитной массы добавляют 1 мл раствора хлорной кислоты, перемешивают и через несколько минут …

Принцип метода Глиоксаль-бис-2-оксианил образует с кальцием в щелочной среде окрашенный комплекс красного цвета, интенсивность которого пропорциональна концентрации кальция. Необходимые реактивы I.  Метиловый спирт (метанол), безводный. II.  Глиоксаль-бис-2-оксианил (ГБОА), 0,05%-ный раствор в метаноле, 50 мг препарата растворяют в 100 мл этанола (раствор нестойкий). III.  Боратный буфер рН 12,6 — растворяют в воде 10 г едкого натра …

К 1,5 мл боратного буферного раствора прибавляют 0,02 мл исследуемой сыворотки и через l,5 мин 0,5 мл 0,05%-ного раствора ГБОА в метаноле и еще через 1,5 мин 1 мл смеси метанола и ацетона. Фотометрируют точно через 5—10 мин после добавления 0,05%-ного раствора ГБОА при длине волны 540—550 нм в кювете с длиной оптического пути 1 …

Вода является самым распространенным веществом организма. На ее долю приходится 60% массы тела у мужчин и 52% у женщин. Все биохимические реакции протекают в водных растворах внутри клеток и во внеклеточном пространстве. Водонерастворимые органические вещества, например жиры, транспортируются в виде комплексов с водорастворимыми белками. Неорганические и многие органические вещества присутствуют в растворах в виде ионов. …

Натрий — основной катион внеклеточного пространства, играет главную роль в поддержании осмотического давления. Нормальная концентрация: в цельной крови — 70—98 ммоль/л, в плазме — 130—156 ммоль/л, в слюне — 6,5—21,7 ммоль/л, в эритроцитах — 13—22 ммоль/л. Общее содержание в организме — 2700—3000 ммоль (1 ммоль — 23 мг), запас в костных депо — 800—1000 ммоль. …

Калий — основной внутриклеточный катион, участвующий в поддержании осмотического давления, кислотно-щелочного баланса, некоторых функций клеток, особенно нервных и мышечных. Концентрация калия в организме существенно влияет на работу сердца. Нормальная концентрация: в крови — 38,4—64,0 ммоль/л, в плазме — 3,4—5,3 ммоль/л, в эритроцитах — 79,8—99,3 ммоль/л, в моче — 80—100 ммоль/л. Общее содержание в организме — …

Принцип метода Разведенная водой плазма или сыворотка крови распыляется и в виде мельчайших капелек с током воздуха поступает в пламя газовой горелки, которому калий придает слабое красно-фиолетовое, а натрий ярко-желтое окрашивание. Интенсивность окраски измеряется фотоэлементом. В связи с тем, что концентрация калия в плазме невелика, при его определении калибровочный раствор должен содержать также соли натрия, …

Есть два способа приготовления калибровочных растворов. В первом случае сначала готовят серию основных калибровочных растворов, концентрации электролитов в которых перекрывают возможный диапазон колебаний состава плазмы, а затем эти растворы разводят так же, как и исследуемую плазму. Этот способ позволяет в максимальной степени избежать погрешностей, связанных с неточностями пипеток, используемых при разведении, но необходим двойной набор …