Исследование водно-солевого обмена
Принцип метода Белки осаждают трихлоруксусной кислотой, которая при прогревании разрушает также комплекс железа с трансферрином. Для установления оптимальной величины рН 4,8—5,0 добавляют аммония ацетат, а для восстановления всего железа — гидразин. Двухвалентное железо образует окрашенный комплекс с батофенантролином, который переведен в сульфатированную форму добавлением хлорсульфоновой кислоты. Необходимые реактивы I. Трихлоруксусная кислота, 20%-ная. II. Аммония ацетат: …
К 2 мл исследуемой сыворотки прибавляют 2,5 мл воды и 1,5 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, перемешивают и ставят на 15 мин на водяную баню температуры 90—95 °С. Затем центрифугируют в течение 20 мин при скорости 2000 об./мин и отбирают 4 мл прозрачного слоя, к которым приливают 0,35 мл 70%-ного раствора аммония ацетата и 0,3 …
Принцип метода Сывороточное железо восстанавливают тиогликолевой кислотой, белки осаждают трихлоруксусной кислотой, в фильтрате устанавливают нужную величину рН, добавляя ацетат натрия, и проводят цветную реакцию с батофенантролином. В связи с тем, что он в воде нерастворим, используют спиртовой раствор. Необходимые реактивы I. Кислота тиогликолевая, кислота трихлоруксусная, раствор 400 г/л. II. Натрия ацетат, насыщенный раствор (в случае …
К 0,7 мл сыворотки прибавляют 2 капли тиогликолевой кислоты, взбалтывают, а затем еще 0,35 мл 1 н НСl, опять перемешивают и прибавляют 0,2 мл раствора трихлоруксусной кислоты. Энергично размешивают стеклянной палочкой в течение 45 сек., а затем центрифугируют при скорости 2500 об./мин. В пробирку с притертой пробкой отбирают из надосадочной жидкости 0,7 мл, к которым …
Магний — второй по концентрации после калия внутриклеточный катион, входит в состав ряда ферментов. Наиболее необходим для функционирования сердца, нервной и мышечной ткани. Нормальная концентрация: в плазме — 0,7—1,2 ммоль/л, в моче — 3—5 ммоль/сутки. Общее содержание в организме — около 1640 ммоль, из них: в скелете — около 50%; в мышцах — около 30%. …
Принцип метода Исследуемую сыворотку выдерживают с раствором трехвалентного железа, при этом весь трансферрин насыщается. Избыток солей железа удаляют адсорбцией на карбонате магния и определяют содержание железа в надосадочной жидкости одним из приведенных выше методов. Необходимые реактивы Железо хлорное, 5 мг/мл — 2,42 г FeCl3 * 6H*O растворяют в 100 мл 0,005 н HCl. Магния карбонат в …
Принцип метода Магний в щелочной среде образует комплекс красного цвета с титановым желтым, присутствие гидроксиламина стабилизирует окраску. При анализе сыворотки или эритроцитов белки осаждают вольфраматом натрия, моча предварительно разводится до нужной концентрации. Необходимые реактивы I. 0,075%-ный раствор титанового желтого: 18,7 мг вещества растворяют в 25 мл воды, хранят в холодильнике в темной склянке (реактив очень …
Принцип метода Моча минерализуется с серной кислотой, образовавшийся пирофосфат железа разрушается гидролизом на кипящей водяной бане, раствор нейтрализуется ацетатом аммония, железо восстанавливается сульфатом гидразина и проводится цветная реакция с сульфонированным батофенантролином. Необходимые реактивы I. Кислота серная концентрированная. II. Перекись водорода, 30%-ный раствор в воде (пероксид). III. Сульфат гидразина, насыщенный раствор: 2,5 г вещества заливают 100 …
К 2 мл воды добавляют 1 мл исследуемой сыворотки и 1 мл 10%-ного вольфрамата натрия, затем 1 мл 0,67 н серной кислоты. Перемешивают стеклянной палочкой, а затем через 10—15 мин центрифугируют или фильтруют. В градуированную пробирку или мерный цилиндр с отметкой 10 мл отмеривают 2,5 мл безбелкового фильтрата, добавляют каплю индикатора метилового красного и 0,2 …
В колбу Кьельдаля помещают 5 мл исследуемой мочи и 1 мл концентрированной серной кислоты и нагревают на электрической плитке с закрытой спиралью или на песчаной бане, не должно быть бурного кипения и образования пены, которая поднималась бы в горлышко колбы. В конце сжигания должны образовываться тяжелые белые пары, занимающие нижнюю часть колбы. Когда материал потемнеет …
