Формалин с солями аммония образует гексаметилентетрамин, освобождаемые кислые радикалы солей аммония оттитровывают 0,1%-ным раствором щелочи в присутствии фенолфталеина.
Необходимые реактивы
I. 30%-ный раствор хлорида железа (FeCl3).
II. 1—2%-ный спиртовой раствор фенолфталеина.
III. Гидроксидкальция [Са(ОН)2] в порошке.
IV. 0,1%-ная HCl.
V. Формалин, разведенный 1 : 2 и нейтрализованный 0,1%-ным раствором гидроксида натрия (щелочи).
Растирают 10 г кала, постепенно добавляя 90 мл дистиллированной воды. Затем переливают в колбу и при встряхивании добавляют 2 мл 30%-ного хлорида железа. Спустя 10 мин вносят 25 капель раствора фенолфталеина. В эту смесь добавляют 10 мл дистиллированной воды, в которой растворены 2 г гидроксида кальция, до появления красного окрашивания смеси. Через 10 мин смесь фильтруют и доводят до 100 мл дистилированной водой. Смесь должна быть прозрачной, мутность появляется при излишке гидроксида кальция. 25 мл фильтрата выливают в колбу и нейтрализуют 0,1%-ной HCl до бледно-розовой окраски. Затем добавляют 5 мл формалина, после чего фильтрат обесцвечивается. Далее проводят тестирование 0,1%-ным раствором гидроксида Na до появления бледно-розовой окраски. Количество щелочи, прошедшей тестирование, умножают на 4, получая количество аммиака на 10 г кала.
В нормальных условиях количество аммиака в кале (в 10 г) соответствует приблизительно 4 мл 0,1%-ного раствора гидрата натрия. Количество аммиака в кале отражает интенсивность гниения в толстом кишечнике. Практически пищевой белок расщепляется и всасывается в тонкой кишке, а гнилостному распаду подвергается чаще белок, выделяемый стенкой толстого кишечника. Следовательно, увеличение аммиака в кале говорит о гиперсекреции и воспалительной экссудации в толстых кишках, но так как распад белка до аммиака требует длительного времени, то при учащенной дефекации его количество в испражнениях даже при колитах может быть нормальным.