Иммунологические реакции используются для выявления специфических антител, идентификации возбудителей и других антигенов, определения групп крови и подбора адекватного донора при пересадках органов и тканей.
Серологические реакции — реакции между антигенами и антителами in vitro — применяют для выявления неизвестного антигена или антитела с помощью известного антитела или антигена соответственно.
Корпускулярные антигены дают феномен агглютинации, растворимые — преципитации. В лабораторной практике используют реакции агглютинации, преципитации, связывания комплемента и др.
Антигены, по которым отдельные индивидуумы или группы особей одного вида различаются между собой, являются изоантигенами.
Изоантигены, генетически связанные, объединены в группы, получившие названия: система АВО, резус и др.
В плазме человека всегда содержатся естественные, полные, холодовые изоантитела к агглютиногенам А и В. Агглютинин анти-А — a-агглютинин, а агглютинин анти-В — b -агглютинин.
Групповая принадлежность людей по системе АВО
| Группа крови | Агглютиноген | Агглютинины | Обозначение |
| I | 0 | α — и β — | 0 ( I ) |
|
II |
A | β — | A ( II ) |
| III | B | α — | B ( III ) |
| IV | AB | 0 | AB ( IV ) |
Определение группы крови (определение агглютиногенов)
Реакцией агглютинации с помощью стандартных сывороток определяют групповые агглютиногены в эритроцитах. Ампулы или флаконы со стандартными сыворотками двух различных серий каждой группы ставят в 2 штатива, имеющих по 3 гнезда, или в 1 штатив с двумя рядами гнезд. Слева направо ставят сыворотки групп 0 α—β (I), А β (II), В α (III). Отдельно ставят сыворотку АВ0 (IV). Определение производят на белых пластинах или тарелках. На левой стороне делают надписи 0 α-β, в середине — А β, справа — В α. Под соответствующей надписью наносят по 0,1 мл каждой стандартной сыворотки отдельной для каждой сыворотки пипеткой.
Кровь для исследования берут из пальца, 0,01 мл крови сухой стеклянной палочкой наносят рядом с каждой каплей стандартной сыворотки. Перемешивают капли стандартной сыворотки с исследуемой кровью. После этого пластину покачивают, затем на 1—2 мин оставляют в покое и снова периодически покачивают. Наблюдение за ходом реакции проводят не менее 5 мин, несмотря на то что агглютинация начинается в течение первых 10—30 сек., так как возможна поздняя агглютинация, например эритроцитами группы А2 (II).
По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин, в те капли, в которых наступила агглютинация, добавляют изотонический раствор хлорида натрия и продолжают наблюдение при покачивании пластинки в течение 5 мин, после чего оценивают результат. При положительной реакции в смеси появляются видимые невооруженным глазом мелкие красные зернышки (агглютинанты), состоящие из склеенных эритроцитов. При этом сыворотка полностью или частично обесцвечивается. В случае отрицательной реакции на протяжении всего времени наблюдения (5 мин) жидкость остается равномерно окрашенной в красный цвет, и в ней не обнаруживаются агглютинаты. Результаты реакции в каплях с сыворотками одной группы обеих серий должны быть одинаковыми.
Возможны различные комбинации реакций:
-
сыворотки всех трех групп дали отрицательную реакцию — испытуемая кровь принадлежит к группе 0 (I);
-
сыворотки групп 0 α-b (I) и В α (III) дали положительную реакцию, а сыворотка группы А b (II) — отрицательную: испытуемая кровь принадлежит к группе А (II);
-
сыворотки группы 0 α-b (I) и А Я (II) дали положительную реакцию, а сыворотка группы В α (III) — отрицательную: испытуемая кровь принадлежит к группе В (III);
-
сыворотки всех групп дали положительную реакцию. В этом случае для исключения неспецифической агглютинации проводят дополнительное контрольное исследование со стандартной сывороткой АВ0 (IV).
Отсутствие агглютинации в капле этой сыворотки при наличии ее во всех остальных позволяет отнести кровь к группе АВ0 (IV). Наличие агглютинации с сывороткой группы АВ0 (IV) говорит о неспецифической агглютинации. В этих случаях нужно исследование повторить с отмытыми эритроцитами