Методы исследования мочевины сыворотки крови
Из всего разнообразия методов исследования мочевины в качестве унифицированных в лабораториях утверждены следующие:
- экспресс-метод определения содержания мочевины с использованием реактивной бумаги «Уратест»;
- диацетилмонооксимный метод, который может быть применен при работе как с отечественными реактивами, так и с наборами реактивов фирмы «Лахема»;
- ферментативный метод с применением кристаллического препарата уреазы.
Принцип метода Мочевина образует с диацетилмонооксимом в сильнокислой среде в присутствии тиосемикарбазида и ионов трехвалентного железа красный комплекс. Необходимые реактивы I. Трихлоруксусная кислота, 100 г/л. II. Диацетилмонооксим, 25 г/л водный раствор. Реактив стабилен. III. Тиосемикарбазид, 2,5 г/л водный раствор. Для приготовления реактива можно пользоваться также тиосемикарбазида гидрохлоридом; последний применяется в виде 3,2 г/л водного раствора. …
Опытная проба: в центрифужную пробирку наливают 0,8 мл воды, 0,2 мл сыворотки и 1 мл 100 г/л раствора трихлоруксусной кислоты, смешивают. Через 15—20 мин центрифугируют. В чистую пробирку вносят 0,5 мл надосадочной жидкости и 5 мл цветного реактива. Пробирку выдерживают на кипящей водяной бане в течение 20 мин, затем охлаждают в течение 2—3 мин под …
Принцип метода Мочевина под действием уреазы разлагается на углекислый газ и аммиак, который в щелочной среде с гипохлоритом натрия и фенолом образует индофенол синего цвета (метод Бертло). Светопоглощение образовавшегося продукта пропорционально содержанию мочевины в образце. Необходимые реактивы I. Уреаза. Для определения пригодна уреаза с активностью > 5 МЕ/мг. II. Этилендиамин-N, N, N, N-тетрауксусной кислоты динатриевая …
Специальное оборудование: спектрофотометр или колориметр с кюветой для микроизмерений; полуавтоматические микропипетки. Ход определения Перед определением сыворотку разводят 0,154 моль/л раствором хлорида натрия в отношении 1 : 9. Опытная проба: 100 мкл рабочего раствора уреазы вносят в пробирку, добавляют 20 мкл разведенной сыворотки. Закрывают пробкой, перемешивают и инкубируют в течение 15 мин при температуре 37 °С. …
При трактовке результатов анализа следует исходить из того, что диета с низким содержанием белка может уменьшить концентрацию мочевины, и наоборот, избыточное питание азотистыми продуктами повышает уровень мочевины. Диета, бедная ионами хлора, также нередко приводит к повышению концентрации мочевины. Поэтому в большинстве случаев повышение концентрации мочевины до 12 ммоль/л считается физиологически допустимым. Однако существует мнение, что …
