Изосерологические исследования крови
Проба Кумбса основана на свойствах неполных блокирующих антител. Блокирующие антитела имеют, по-видимому, только одну активную гаптотрофную группу, способную прочно фиксироваться на антигенных детерминантах эритроцитов. Фиксация блокирующих антител на эритроцитах настолько прочна, что они не удаляются после многократных отмывок сенсибилизированных эритроцитов физиологическим раствором хлористого натрия и выявляются в антиглобулиновой пробе. Вторая гаптотрофная группа блокирующих антител не …
Определение резус-принадлежности производится на водяной бане при температуре в среднем +46°. Лучше всего иметь водяную баню, поддерживающую заданную температуру автоматически. Однако при ее отсутствии в качестве водяной бани можно использовать любой достаточно широкий сосуд, в который можно поместить 5 — 10 л воды. Сосуды меньшей емкости использовать в качестве водяной бани нет смысла, так как …
В штатив тремя рядами устанавливаются лабораторные пробирки высотой приблизительно 100 мм. Все пробирки каждого ряда нумеруются по порядку слева направо. Таким образом, под каждым номером будет значиться по три пробирки, расположенные одна за другой. Во все пробирки согласно их нумерации вносится по 2 капли исследуемой сыворотки. При этом необходимо помнить, что порядковый номер исследуемой крови …
Для приготовления контрольных сенсибилизированных эритроцитов в пробирку вносятся 3 капли стандартной сыворотки антирезус, содержащей неполные антитела, и 1 капля отмытых эритроцитов. Содержимое пробирки тщательно перемешивается встряхиванием, и она помещается на 30 мин в термостат при температуре +37°. По окончании инкубации сенсибилизированные эритроциты трижды отмываются физиологическим раствором хлористого натрия по описанной ранее методике. При невозможности ставить …
Наиболее точные результаты выявления неполных иммунных антител достигаются применением непрямой пробы Кумбса. Из технического оснащения для подбора крови этим методом необходимо иметь прежде всего лабораторную центрифугу и термостат, из реагентов — антиглобулиновую сыворотку Кумбса. Кровь реципиента берется в количестве 8 — 10 мл в пробирку без стабилизатора. Эритроциты донорской крови берутся из контрольных пробирок. В …
В ряде случаев в крови человека содержатся неполные блокирующие антитела, которые направлены против антигенов собственных эритроцитов больного или антигенов, близких к нему по строению. Такие антитела фиксируются на эритроцитах больного и не удаляются с них после отмывания в физиологическом растворе хлористого натрия. Схема прямой и непрямой проб Кумбса R. Damerow Если отмыть эритроциты, на которых …
Эритроциты употребляются для исследования в виде 5 — 10%-ной взвеси в собственной сыворотке. Наиболее четкий результат наблюдается при работе с 10%-ной взвесью, которая чаще всего приготовляется на глаз путем встряхивания пробирки. Кровь, взятая для анализа, может храниться в холодильнике при температуре +4 — 1-8° на протяжении 2 — 3 суток. Долгое хранение сопровождается снижением агглютинационных …
Результат учитывается просматриванием пробирок сразу же после их переворачивания в проходящем свете (на фоне окна или света матовой лампы). При положительном результате в пробирке видны агглютинаты в виде взвешенных крупинок или хлопьев. Содержимое пробирок при этом в некоторой мере обесцвечивается. При отрицательном результате содержимое пробирок остается окрашенным в равномерный розовый цвет и признаков агглютинации не …
Учет результатов производится на основании наличия или отсутствия агглютинации в каплях с исследуемыми и контрольными эритроцитами. При положительном результате в каплях видна агглютинация эритроцитов, при отрицательном — капли остаются равномерно окрашенными в розовый цвет. Положительная реакция говорит о том, что прямая проба Кумбса положительна, т. е. исследуемые эритроциты сенсибилизированы и на них фиксированы антитела. Отрицательный …
По окончании инкубации все образцы эритроцитов трижды отмываются физиологическим раствором хлористого натрия. Из каждого образца отмытых донорских эритроцитов приготовляется приблизительно 5%-ная взвесь в физиологическом растворе. Затем в порядке расположения пробирок в штативе по 1 капле взвеси эритроцитов из них переносится на тарелку и ко всем каплям добавляется по 1 капле антиглобулиновой сыворотки. Отсутствие агглютинации означает, …
