Исследование антител
Исследование неполных антител антирезус непрямой пробой Кумбса включает два самостоятельных этапа: определение неполных блокирующих антител антирезус и их титра. Эти этапы исследования могут осуществляться одновременно. Определение неполных блокирующих антител антирезус в крови сенсибилизированных к резус-фактору лиц производится непрямой пробой Кумбса. Оснащение, необходимое для проведения непрямой пробы Кумбса, описано в соответствующем разделе. Для исследования неполных блокирующих …
После инкубирования смеси исследуемых сывороток со стандартными эритроцитами последние трижды отмываются в физиологическом растворе. Для этого во все пробирки доливается доверху физиологический раствор и их содержимое перемешивается путем переворачивания. После чего пробирки центрифугируются при 1000—1500 об/мин до полного осаждения эритроцитов (обычно 5 мин). Затем недостаточная жидкость удаляется, и пробирки снова наполняются физиологическим раствором. Отмывание эритроцитов …
Сенсибилизация эритроцитов производится сывороткой антирезус, в которой заведомо содержатся неполные блокирующие антитела антирезус. Результат определяется через 5 мин в зависимости от реакции агглютинации в каплях исследуемых сывороток со стандартными резус-положительными и резус-отрицательными эритроцитами. При положительной реакции видна агглютинация резусположительных эритроцитов. Реакция с резус-отрицательными эритроцитами должна быть отрицательной. При отрицательной реакции в капле с резус-положительными эритроцитами …
При исследовании титра неполных блокирующих антител антирезус, как и при их определении, необходимо ставить параллельный контроль с сенсибилизированными и несенсибилизированными резус-положительными эритроцитами. Сенсибилизация стандартных эритроцитов производится сывороткой антирезус, в которой содержатся неполные блокирующие антитела антирезус. После перемешивания антиглобулиновой сыворотки с эритроцитами пластина покачивается равномерными вращательными движениями и наблюдение проводится в течение 5 мин. При положительном …
Необходимое оснащение рабочего места описано в соответствующем разделе. Кровь для приготовления стандартных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов берется в лабораторные пробирки в количестве 1—2 мл. Пробирки после взятия крови наполняются доверху физиологическим раствором хлористого натрия, затем содержимое тщательно перемешивается и центрифугируется при 1000—1500 об/мин до полного осаждения эритроцитов. После центрифугирования отмывная жидкость (физиологический раствор) отсасывается и …
Результат реакции определяется по форме осадка эритроцитов на дне пробирки. Для этого пробирки просматриваются по продольной оси над источником рассеянного света. Заключение делается на основании аг-глютинации. При положительном результате осадок эритроцитов располагается на дне пробирки неравномерным слоем. Осадок шероховат, в ряде случаев отчетливо видна губчатость его структуры. Края осадка изогнуты, иногда завернуты внутрь. В некоторых …
В отдельных случаях при высокой степени сенсибилизации организма к резус-фактору наблюдается так называемый феномен зоны или презоны. Сущность его заключается в том, что антитела антирезус не определяются в цельной сыворотке и могут быть выявлены только при некотором ее разведении. Чаще всего они выявляются при разведении 1 : 8—1 : 16, реже — при более высоком. …
При повторных беременностях сенсибилизированных к резус-фактору женщин резус-положительным плодом на его эритроцитах фиксируются антитела антирезус крови матери, проникшие через плацентарный барьер. Сенсибилизация эритроцитов новорожденного антителами антирезус свидетельствует о развитии у него гемолитической болезни. Сенсибилизация эритроцитов непосредственно в организме может происходить и в других случаях, в частности при иммунных состояниях (приобретенные формы хронических гемолитических анемий и …
С целью проверки активности антиглобулиновой сыворотки и ее специфичности параллельно с основным исследованием ставятся контрольные пробы со стандартными резус-положительными сенсибилизированными и несенсибилизированными эритроцитами. Для приготовления контрольных сенсибилизированных эритроцитов в пробирку вносится три капли стандартной сыворотки антирезус, содержащей неполные антитела, и одна капля отмытых эритроцитов. Содержимое пробирки тщательно перемешивается встряхиванием, и она помещается на 30 мин …
Косвенно об уровне сенсибилизации исследуемых эритроцитов можно судить по титру прямой пробы Кумбса. Для определения титра прямой пробы Кумбса в пробирках (или на плоскости) приготавливается цепь разведений антиглобулиновой сыворотки в физиологиче-ском растворе хлористого натрия от 1 : 2 до 1 : 512 (методика титрования изложена в соответствующем разделе). На пластину переносятся в 9 точек последовательно …
