Исследование водно-солевого обмена
Принцип метода Магний дает с магоном (ксилидиловый синий II) яркое окрашивание, белки сыворотки не препятствуют его развитию. В связи с тем, что на интенсивности окраски сказывается присутствие других катионов, используют комплексный калибровочный раствор. Фирма «Лахема» выпускает набор реактивов для работы этим методом. Необходимые реактивы I. Раствор магона, содержащий 0,28 ммоль/л: 115,4 мг магона при нагревании …
Хлориды поступают в организм в виде солей натрия, кальция, магния, которые при растворении диссоциируют на катионы и анионы хлора. Ионизированный хлор играет большую роль в поддержании кислотно-щелочного равновесия и баланса воды в организме. Нормальная концентрация: в крови — 97—108 ммоль/л, в моче — 150—250 ммоль/сутки. У здоровых людей, несмотря на избыточное или недостаточное поступление хлористого …
Принцип метода Мурексид образует с кальцием в щелочной среде окрашенный комплекс, устойчивость которого повышается путем добавления в раствор глицерина. Необходимые реактивы I. Мурексидглицериновый реактив — 20 мг мурексида растворяют в 10 мл 4 н КОН, 1 мл этого раствора смешивают с 20 мл смеси из 10 мл воды и 10 мл глицерина. II. Калибровочные растворы …
Фосфор находится в организме в форме неорганических фосфатов, в комплексе с липидами (липидный фосфор) и нуклеотидами (кислоторастворимый фосфор). Входит в состав скелета, фосфолипидов мембран, 2,3-дифосфоглицерата (вещества, определяющего способность гемоглобина присоединять кислород), участвует в процессах накопления и освобождения энергии в клетках (в составе АТФ, АДФ, АМФ), в ферментативных реакциях (в составе НАДФ). Поступает с пищей, всасывание …
Унифицированный метод определения фосфора по восстановлению фосфорно-молибденовой гетерополикислоты Принцип метода Белки осаждают трихлоруксусной кислотой, в кислой среде фосфорная кислота образует с молибденовой кислотой фосфорно-молибденовую гетерополикислоту, которая восстанавливается эйконогеном с образованием ярко окрашенного молибденового синего. Необходимые реактивы I. Кислота трихлоруксусная, раствор 100 г/л (10%). II. Кислота серная 5 н. III. Аммоний молибденовокислый, 5%-ный раствор готовят, растворяя …
К 1 мл прибавляют 4 мл воды и 5 мл раствора трихлоруксусной кислоты, через 10 мин центрифугируют или фильтруют. К 5 мл безбелкового фильтрата добавляют 1 мл раствора молибденовокислого аммония, 0,2 мл раствора эйконогена и 1,8 мл воды. Через 20 мин фотометрируют при длине волны 630—690 нм в кюветах с длиной оптического пути 1 см …
Принцип метода Неорганический фосфор образует с молибденовой кислотой фосфорномолибденовую гетерополикислоту, которая, реагируя с основным красителем — малахитовым зеленым, дает зеленовато-синее окрашивание. Если фосфора нет, то малахитовый зеленый в кислой среде окрашен в желто-коричневый цвет. Белок не мешает проведению реакции, поэтому депротеинизацию не проводят, для обеспечения коллоидной устойчивости образовавшегося комплекса в раствор добавляется твин 20. Необходимые …
Унифицированный метод определения фосфора после осаждения белков трихлоруксуснои кислотой Принцип метода. При осаждении белков крови трихлоруксусной кислотой все фосфолипиды осаждаются вместе с белковым сгустком, а неорганический и кислоторастворимый фосфор остаются в растворе. Белковый сгусток минерализуется нагреванием с хлорной кислотой и фосфор определяется эйконогеновым методом. В связи с тем, что белки плазмы не содержат фосфора, весь …
К 0,2 мл исследуемой сыворотки добавляют 3 мл воды и медленно 3 мл 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, через 1—2 мин центрифугируют, надосадочную жидкость сливают — пробирку переворачивают и дают стечь жидкости. К осадку добавляют 1 мл 57%-ной хлорной кислоты, если ее концентрация ниже, соответственно увеличивают количество кислоты, переносят в колбу или в большую пробирку для …
Принцип метода Белки эритроцитов осаждают трихлоруксусной кислотой, надосадочную жидкость подвергают электрофорезу на бумаге в цитратном буфере рН 5,1. Пятна АТФ и АДФ идентифицируют в ультрафиолетовом свете, вырезают, элюируют и количественно определяют прямой спектрофотометрией в ультрафиолетовом свете при длине волны 260 нм. Необходимые реактивы I. Натрия цитрат трехзамещенный. II. Гепарин, ампулированный препарат, активность 5000 ЕД/мл. III. …
